超速離心機(jī)和實(shí)驗(yàn)室常規(guī)高速離心機(jī)的區(qū)別 1、常見離心機(jī)的分類
依據(jù)相對離心力和轉(zhuǎn)速的大小,離心機(jī)可分為:
(1)低速離心機(jī):轉(zhuǎn)速范圍:4000-8000rpm,離心力范圍:1000-10000g;主要用于分離粗粒子懸濁液。
(2)高速離心機(jī):轉(zhuǎn)速范圍:10000-25000rpm,離心力范圍:50000g;主要用于分離乳狀液和細(xì)懸濁液。
(3)超速離心機(jī):轉(zhuǎn)速范圍:25000-150000rpm,離心力范圍:≥505000g,主要用于分離超細(xì)微粒的懸濁液和高分子膠體懸浮液。
2、實(shí)驗(yàn)室常規(guī)高速離心機(jī)和超速離心機(jī)的組成的主要區(qū)別
真空系統(tǒng),當(dāng)轉(zhuǎn)速超過40000rpm時,空氣與轉(zhuǎn)頭之間的摩擦生熱成為嚴(yán)重的問題,因此,超速離心機(jī)添加了真空系統(tǒng)。
3、超速離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的主要參數(shù)及其選擇
(1)轉(zhuǎn)速和離心力:轉(zhuǎn)頭的抗拉強(qiáng)度是有限的,與轉(zhuǎn)頭的類型、構(gòu)造和材料有關(guān)。
(2)容量:每個轉(zhuǎn)頭中容納離心管數(shù)乘以離心管的體積就是該轉(zhuǎn)頭的容量。容量越大,轉(zhuǎn)頭越大,轉(zhuǎn)速越低。
4、超速離心的方法及其應(yīng)用
根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊x擇合適的離心方法:
(1)差速離心:差速離心的分辨率不高,沉降系數(shù)在同一個數(shù)量級內(nèi)的各種粒子不容易分開,常用于顆粒或密度差別較大的組分的分離,或其他分離手段之前的粗制品提取。比如:在碳納米管分散中將單根的碳納米管與成束的碳納米管,以及催化劑顆粒、無定性碳雜質(zhì)等進(jìn)行分離。在進(jìn)行電泳分離或密度梯度離心前現(xiàn)將原始溶液進(jìn)行離心除去大塊雜質(zhì)。
(2)速率區(qū)帶法:速率區(qū)帶離心法適于分離顆粒大小不同而密度相近或相同的組分,如DNA與RNA混合物、溶酶體及過氧化物酶體及密度相近而大小不同的納米顆粒等。
(3)等密度離心法:不同顆粒存在浮力密度差時,在離心力場作用下,在密度梯度介質(zhì)中,顆粒或向下沉降,或向上浮起,一直移動到與它們各自的密度恰好相等的位置上形成區(qū)帶,從而使不同浮力密度的物質(zhì)得到分離。等密度離心的介質(zhì)有:氯化銫、硫酸銫、溴化銫、三碘苯衍生物等。等密度離心的操作:介質(zhì)溶液與樣品液混合均勻,足夠時間離心。介質(zhì)梯度不需預(yù)先制備,離心時把密度均一的介質(zhì)液和樣品混合后裝入離心管,通過離心形成梯度,讓顆粒在梯度中進(jìn)行再分配。常用來分離提取核酸、亞細(xì)胞器和質(zhì)粒。