預(yù)約儀器:提前幾天預(yù)約BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30儀器,以確保實驗?zāi)軌蝽樌M(jìn)行,預(yù)約成功后,采取下一步操作。
準(zhǔn)備:確認(rèn)需要清洗的離心桶、離心桶蓋完好無損
清洗:BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30轉(zhuǎn)頭型號JLA-16-250對應(yīng)的規(guī)格為250ml的低速離心桶,準(zhǔn)備4個。離心桶及桶蓋使用去去污劑刷洗干凈以去除雜蛋白,后使用去離子水沖洗干凈。吸取水檢測蛋白濃度,是否符合要求,以及檢測其中的去污劑是否去除干凈,可省略)。
高壓:將離心桶用牛皮紙包好,貼上高壓鍋滅菌(還未查看是否能支持高壓滅菌)
注意:防止離心桶緊貼高壓鍋,防止損壞。
化凍:將500ml的118、124放于25℃水浴鍋中化凍。
開機:趁化凍期間刷卡接通電源,再打開離心機右側(cè)電源開關(guān)。
放轉(zhuǎn)子:確認(rèn)JLA-16-250轉(zhuǎn)子對準(zhǔn)底座后放入
調(diào)程序:點擊轉(zhuǎn)子對應(yīng)的JLA-16-250所對應(yīng)的型號,選擇轉(zhuǎn)速5000rpm,時間10min,4℃。
注意:不要超過離心機所對應(yīng)的離心轉(zhuǎn)速范圍。
預(yù)冷:蓋上離心機蓋子,然后用雙手按下離心機門,進(jìn)行預(yù)冷。
配平:將要離心的樣品用天平配平,誤差不大于0.1g,配平過程中要包括離心桶的蓋子,密封圈,裝液量要超過離心桶的80%以上。
開蓋:打開離心蓋子時,使用腳踩住開門連鎖裝置,并且雙手輕拂蓋子,防止蓋子被彈開。
離心:離心開始時,注意蓋好蓋子,包括離心機的內(nèi)腔蓋子和離心機主蓋子,再次確認(rèn)所使用的離心機轉(zhuǎn)子型號和所選參數(shù),點擊開始鍵開始離心。
注意:離心速度未達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速時,不能離開離心機,如果出現(xiàn)警報或者異響,應(yīng)立即停止,并聯(lián)系管理人員。
關(guān)機:離心結(jié)束后,先關(guān)閉離心機右側(cè)電源后刷卡下機。
歸位:使用完的物品清洗干凈后,放回原位,并做好登記。
取上清:準(zhǔn)備一個干凈的500ml瓶子,將上清倒入500ml瓶中,并標(biāo)記好名稱、日期,離心后產(chǎn)物,存貯方式。
收集沉淀,將離心桶中的細(xì)胞沉淀收集到合適的EP管中,標(biāo)記名稱、日期、離心后產(chǎn)物。